精子的授精能力依賴于精子的結構、精子的活動力和獲能的質量。精子頂體成分的釋放或者結合并穿透卵子的透明帶是獲能完成的標志。精子在透明帶部位的功能或許是對于精子授精能力的最終檢驗。因為透明帶提供了精子與卵子最初的相互作用所必需的部位。半透明帶精子結合試驗（hemizona assay，HZA）即專用于檢查精子與卵子的透明帶表面緊密結合的試驗。若無這種緊密結合，則授精過程中所有步驟均不能進行。

　　最好是利用活的受精的人卵進行這項測定。然而出于倫理方面的考慮，而且人卵甚難獲得，從而使 HZA 的測定受到了限制。以致近年來這項檢驗人類精子與卵子相互作用測定被分解成兩個試驗：其一是去透明帶倉鼠卵穿透試驗；其二是完好的非存活人卵穿透試驗。最近衍生出很多的精子功能測定方法。包括：嚴格的形態(tài)學評估，肌酐磷酸激酶水平測定、低滲膨脹試驗以及精子 ATP 含量測定等。然而精卵結合的生物測定可能是最有效的，因為這類測定旨在評估受精過程中所必需的精子功能。

　　一、HZA 的目的與臨床應用

　　建立 HZA 的目的是利用配對的人類非存活半透明帶，對于精子結合能力的一致性，通過比較受試患者的精子與已知有生育力的對照者的精子，對其相對結合率來評估精子授精能力。因為應用來自同一卵子的透明帶能很好解決不同卵子的透明帶之間結合能力的變異。以往雖然 HZA 在篩選接受體外受精（IVF）規(guī)劃的對象時多用于檢測男性因素所致的不育者，但目前國外一些機構對于要求治療的不孕男性以及輸精管吻合術后的對象，亦進行HZA 測定，對于經(jīng)過治療的不孕男性、避孕的對象以及接受化療的患者，亦可應用 HZA 檢測其精子功能的變化。

　　二、HZA 方法的建立及其有效性

　　關于 HZA 方法的可行性，已有若干文獻作了報道�，F(xiàn)已證實：① 應用顯微操作裝置能很容易地將透明帶切成二等分；② 無論是取自卵巢還是取自未成熟的 IVF 卵子，均不影響精子與其結合；③ 精子對于半透明帶外表面的緊密結合與對于完好的透明帶的結合能力是相同的；④ 精子對于一分為二的配對半透明帶表面的緊密結合亦是相同的。

　　有關精子結合于半透明帶（來源于證明有生育能力的供體）的動力學研究顯示，兩者的緊密結合在共培養(yǎng) 1h以內即已啟動。

　　重要的是精子結合在證明有生育能力的男子通常于 4h左右達高峰，因而 HZA 采用 4h培養(yǎng)期。而且對于生育能力較差的男子，其精子結合的動力學曲線形態(tài)顯示與正常男子曲線相仿，也在 4h左右達高峰。有關研究已證實對于一分為二的配對半透明帶，精子結合的動力學曲線在其培養(yǎng)的 8。5h內無論形態(tài)還是峰值均非常接近。

　　已有學者在 3項不同的研究中，應用已接受 IVF 治療的男子的精子檢查了 HZA 結果的臨床意義。鑒于在 10個實驗中，每次均應用配對的半透明帶進行 HZA，與來自接受 IVF 治療而尚未獲得體外受精的男性相比，有生育力男性的精子能更有效地結合半透明帶（分別為34。0±8。0和 5。9±2。0）。因此半透明帶精子結合試驗指數(shù)（hemizonaassayindex，HZAI）的計算公式應為：

　　HZAI=（結合于半透明帶的受檢精子數(shù) /結合于半透明帶的對照精子數(shù)）×100

　　在另一項研究中，進行 HZA 操作的技術員，并不知道對象的病史、病因和 IVF 結果。36例對象中，畸型精子是其惟一的異常結果，其中 27例能使妻子至少一個卵子受精，其緊密結合半透明帶平均精子數(shù)為 36。1±7。0；其余 9例對象在接受 IVF 治療過程中并未發(fā)生受精，其緊密結合半透明帶平均精子數(shù)為 10。4±4。0（ P <0。05）。

　　最初的 HZA 是應用凍-融的未成熟卵進行的。這些卵子幾乎均是在卵巢活檢時獲得的，所有卵子均在 -70℃ 條件貯存于 2mol/L 二甲亞砜（dimethylsulphoxide，DMSO）中。有關的實驗顯示透明帶貯存于鹽溶液，也能反映相同的精子結合能力。無論是低溫下貯存于DMSO，還是室溫下貯存在高濃度鹽溶液中，這些卵子對于測定相同的精液標本均能提供具有相同結合動力學和相等能力的半透明帶。鑒于透明帶貯存于緩沖鹽溶液中可使操作簡單、運送方便，更易為某些實驗室所采用。